APOPTRAK是一種小分子(442 Da ),屬于蒽醌家族。其最佳激發(fā)波長為633或647納米，發(fā)射波長為遠(yuǎn)紅外/近紅外(NIR ),峰值波長為700納米。

APOPTRAK是流式細(xì)胞儀應(yīng)用中一種有用的染料:

• APOPTRAK是一種低毒性染料，其光譜特性與DRAQ5相似，但與細(xì)胞DNA結(jié)合的能力降低。作為電荷中性的APOPTRAK能夠以低但可檢測的速率進(jìn)入活細(xì)胞，主要占據(jù)細(xì)胞質(zhì)區(qū)域。
• 當(dāng)質(zhì)膜破裂后有更多染料進(jìn)入時(shí),“完整/活"細(xì)胞中的APOPTRAK遠(yuǎn)紅色熒光信號(hào)增加。APOPTRAK的殘留DNA結(jié)合能力允許在細(xì)胞分裂過程中檢測核碎片。

為什么選擇APOPTRAK？

APOPTRAK受益于其母體所有有利的“遠(yuǎn)紅"光譜特性，但其進(jìn)入活細(xì)胞的速率有顯著不同。APOPTRAK緩慢進(jìn)入活細(xì)胞，而快速進(jìn)入凋亡細(xì)胞，從而對(duì)這兩種人群進(jìn)行陽性區(qū)分。主要優(yōu)勢包括:-

• 進(jìn)入活細(xì)胞和凋亡細(xì)胞的不同速率，允許通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行陽性區(qū)分(例如，用膜聯(lián)蛋白V-FITC)
• 易于使用——無需裂解、清洗、不需要核糖核酸酶
• 非常適合與GFP和FITC標(biāo)簽一起使用——apop trak熒光在遠(yuǎn)紅外區(qū)

APOPTRAK可為您的應(yīng)用帶來顯著優(yōu)勢:

• 完整細(xì)胞、膜受損細(xì)胞、細(xì)胞碎片
• 經(jīng)驗(yàn)證可用于膜聯(lián)蛋白V結(jié)合分析方案

技術(shù)資料

APOPTRAK緩慢進(jìn)入活細(xì)胞，快速進(jìn)入滲漏(凋亡)細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞類型和處理方式，產(chǎn)生5-10倍的信號(hào)強(qiáng)度差異。這允許在這兩個(gè)群體之間進(jìn)行積極的區(qū)分，如下面的示例數(shù)據(jù)所示。

公布的數(shù)據(jù)(Wiltshire等人，Cytometry 2000)表明，當(dāng)與膜聯(lián)蛋白v聯(lián)合使用時(shí)，APOPTRAK具有區(qū)分早期和晚期凋亡細(xì)胞的能力。以下示例顯示了在攜帶低凋亡細(xì)胞負(fù)荷的B細(xì)胞淋巴瘤樣品中對(duì)APOPTRAK的攝取。細(xì)胞用with膜聯(lián)蛋白v共染色

• exλ最大633納米
• Emλmax 700.5 nm，與DNA結(jié)合后紅移12 nm
• 建議的最佳排放過濾器包括Cy5、695LP、730/50BP或780/60BP